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新的色譜柱柱活化沖洗技巧
  • 發(fā)布日期:2021-10-09      瀏覽次數(shù):7473
    •                                                           新的色譜柱柱活化沖洗技巧

                                                            檢碩科學(xué)器材(上海)有限公司

      新的色譜柱柱活化沖洗技巧

      方法/步驟

      一、新的色譜柱活化:采用100%甲醇1ml/min沖洗60min,再換成流動(dòng)相進(jìn)行平衡;如果流動(dòng)相中含有緩沖鹽,在換成流動(dòng)相前,請(qǐng)使用過(guò)渡流動(dòng)相過(guò)渡后再換流動(dòng)相平衡;

      二、日常維護(hù)

      1、建議檢測(cè)前樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾;

      2、建議每天做完樣品后及時(shí)進(jìn)行清洗;

      3、常規(guī)檢測(cè)

      測(cè)試完后,直接把色譜柱反向連接采用90%有機(jī)相沖洗45min,最后保存在純甲醇或純乙腈中;

      4、使用緩沖鹽條件:

      1)等度條件:使用緩沖鹽之前和之后都用過(guò)渡流動(dòng)相以1ml/min流速?zèng)_洗45min;

      2)梯度條件:使用緩沖鹽之前與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1ml/min流速?zèng)_洗45min;

      注意:過(guò)渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相比例與分析流動(dòng)相相同比例,只是不含有緩沖鹽;

      3)緩沖鹽沖洗干凈后,采用90%有機(jī)相反向沖洗60min,最后保存在純有機(jī)溶劑中;

      注意:如果使用緩沖液不能存留色譜柱中過(guò)夜;

      三、色譜柱的保存

      1. 短時(shí)間內(nèi)色譜柱的保存

        如果使用時(shí)間間隔不超過(guò)四天,則色譜柱無(wú)需特別的維護(hù),只需根據(jù)最后一次測(cè)試使用的流動(dòng)相或樣品的性質(zhì),在使用后用純甲醇、純水或甲醇與水的混合溶液進(jìn)行淋洗,直至基線走平約半小時(shí)即可。

       2. 長(zhǎng)時(shí)間色譜柱的保存

      如色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不用,則最好將其從HPLC儀中取下保存,取下前用合適的溶劑淋洗,洗去不適與保存色譜柱的洗脫液,如C18反相柱可以用純甲醇或乙腈作為保存的介質(zhì),然后用塑料塞頭將其塞緊,以免色譜柱內(nèi)*干燥。

      END

      注意事項(xiàng)

      色譜柱使用pH范圍在1.5~10.0,通常建議使用范圍pH為2.0~8.0比較合適,流動(dòng)相超出pH范圍將會(huì)導(dǎo) 致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相斷裂使柱效下降,使用壽命變短,所以要嚴(yán)格控制pH范圍

                                                                                                                                                 本篇轉(zhuǎn)載至實(shí)驗(yàn)之家

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